承接 疾控中心 醫院 PCR實(shí)驗室 設計裝修

一、PCR實(shí)驗室的設計原則

標準的PCR實(shí)驗室一般分為4個(gè)區域：一區為試劑準備區，二區為標本制備區，三區為PCR擴增區，四區為產(chǎn)物分析區。

為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區域必須嚴格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產(chǎn)物分析區。各實(shí)驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過(guò)傳遞窗進(jìn)行。

二、PCR實(shí)驗室各分區介紹

2.1試劑準備區（1區）

該實(shí)驗區主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的制備。試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區，不得經(jīng)過(guò)其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內，并在本區內制備成所需的貯存試劑。

房間的面積宜控制在15㎡~20㎡。本區的壓力梯度要求為:相對正壓狀態(tài)，以防止外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染。

2.2標本制備區（2區）

該區域主要進(jìn)行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時(shí)cDNA的合成。

標本制備區的面積宜在25㎡~30㎡之間。本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為正壓，以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會(huì )發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應避免在本區內不必要的走動(dòng)。

2.3 擴增反應混合物配制和擴增區（3區）

該區域主要進(jìn)行的操作為DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來(lái)自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進(jìn)行。

擴增室主要配備PCR實(shí)驗室的核心儀器PCR儀，在實(shí)驗室建造過(guò)程中，需要給PCR儀配備專(zhuān)門(mén)的UPS電源，以保證其正常工作。該區面積控制在15㎡~20㎡。

本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為負壓，以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區內的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應在超凈臺內進(jìn)行。建議采用≥10Pa壓差，在控制上比較容易實(shí)現。

2.4 擴增產(chǎn)物分析區（4區）

該區域主要進(jìn)行的操作為擴增片段的測定。本區是最主要的擴增產(chǎn)物污染來(lái)源，因此對本區的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區域為負壓，以避免擴增產(chǎn)物從本區擴散至其它區域。

在室內配備通風(fēng)櫥，保證房間內的相對負壓，空氣從室外流向室內。該區面積控制在15m2~20m2。

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